Experiment: DNA-Isolierung

Unsere Erbsubstanz (DNA) findet sich im Zellkern jeder Zelle.

Das folgende einfach durchführbare Experiment dient zur Isolierung von DNA aus Mundschleimhautzellen. Die so isolierte DNA ist zwar noch durch andere Substanzen (z.B. Proteine) verunreinigt, veranschaulicht aber sehr gut das Prinzip der DNA-Isolierung.

 Reagenzien:

Extraktionspuffer, eiskalter Ethanol, Reaktionsgefäße (einfache Gläser, möglichst klein oder Reagenzgläser, Glycerin, Lebensmittelfarbe)

Der Extraktionspuffer besteht neben Kochsalz und Natriumcitrat hauptsächlich aus Wasser und Spülmittel.

Vorgehensweise:

• Ca. 5 ml Speichel in einem Glas sammeln. Dabei möglichst gut die "Backeninnenseiten" mit den Zähnen abschleifen. Ziel: so viele Mundschleimhautzellen wie möglich im Speichel zu erhalten.
• 10 ml Extraktionspuffer dazugeben und gut, aber vorsichtig mischen.
• Probe 10 Minuten bei Raumtemperatur stehen lassen.

Während dieser Zeit lösen sich die Zellmembranen auf (-> Detergenz!) und die DNA, Proteine usw. werden aus der Zelle freigesetzt.

• Die Probe nun mit 10 ml eiskaltem Ethanol vorsichtig überschichten. 

Die Ethanolzugabe entzieht der DNA die Hydrathülle, die an der Puffer-Ethanol-Grenzschicht in Form langer Fäden sichtbar wird.

• DNA vorsichtig aus Lösung herausziehen.
• In Glycerin kann die DNA über Jahre hinweg gelagert werden.